Fiches Techniques

Principe : L’électrophorèse est une technique séparative. Elle est utilisée le plus souvent dans un but analytique mais également parfois pour purifier des molécules solubles. Elle n’est donc pas adaptée à la séparation des lipides. Le principe consiste à soumettre un mélange de molécules à un champ électrique ce qui entraîne la migration des molécules chargées. En fonction de différents paramètres (charge, masse, forme, nature du support, conditions physico-chimiques) la vitesse de migration va être variable, ce qui permet la séparation des différentes molécules. A partir de ce principe général, il existe plusieurs variantes de cette technique adaptées à différentes situations.

• L’électrophorèse en conditions non dénaturantes : Dans l’électrophorèse en conditions non dénaturantes, les molécules sont séparées dans leur état le plus proche possible de leur état natif.
• L’électrophorèse en conditions dénaturantes : Comme son nom l’indique, dans cette variante, les molécules sont soumises à un traitement dénaturant préalablement à leur séparation électrophorétique, détruisant la structure tridimensionnelle native.
• L’électrophorèse bidimensionnelle : L’électrophorèse bidimensionnelle ne fait que reprendre les deux types d’électrophorèses présentées ci dessus mais appliquées successivement sur le même gel selon deux orientations différentes.

Intérêt/objectif :

L’électrophorèse est une technique séparative. Par exemple, la séparation et l’identification de protéines par électrophorèse de liquides biologiques est utilisée en immunologie, notamment pour confirmer le diagnostic de personnes atteintes d’un disfonctionnement du système immunitaire, en particulier celles concernant l’immunité humorale.

Des pathologies rares affectant la production des anticorps comme l’agammaglobulinémie, absence de sécrétion des gammaglobulines et l’hypogammaglobulinémie, sécrétion insuffisante des gammaglobulines, peuvent être détectées par électrophorèse des protéines sériques.